学 时：36学时
学 分：26学分
课程性质：必修
实验个数：12个实验
适用专业：生物工程
大纲执笔人：贾乐、闫艳春、周波
大纲审定人：贾乐
一、实验课的性质与任务
本实验课属于《普通微生物学A》的实验课。
二、实验目的与要求
通过实验课能掌握显微镜的使用、常用的染色技术、无菌操作技术、消毒灭菌技术，掌握培养基配制、菌种筛选与保藏、发酵产物的提取、菌种鉴定，了解微生物的分类、理化、遗传等方面的实验操作，通过实验印证课堂内容，加深对微生物的感性认识。
实验一 光学显微镜的使用及细菌的简单染色法（3学时）
使学生熟悉光学显微镜的构造及各部分功能，学习并掌握低倍镜、高倍镜、尤其是油镜的原理和使用方法，熟练掌握细菌的简单染色法。
实验二 革兰氏染色法（3学时）
巩固光学显微镜（油镜）的使用方法及无菌操作技术，了解并掌握革兰氏染色的原理和方法，对实验中可能出现的假阳性和假阴性结果有较清楚的认识。
实验三 细菌的芽孢染色法和荚膜染色法（3学时）
了解细菌芽孢和荚膜的形态特征，芽孢的抗热机制，掌握细菌芽孢和荚膜的染色步骤和方法，知道为什么芽孢染色时需要加热以及观察荚膜形态时要用负染法。
实验四 放线菌的形态观察（3学时）
了解放线菌的形态结构，熟悉基内菌丝、气生菌丝、孢子丝及分生孢子的功能，掌握放线菌的染色步骤和方法。
实验五 霉菌的形态观察即菌落特征观察（3学时）
了解根霉、青霉、毛霉、曲霉等霉菌的形态特征，掌握四种霉菌的取材和染色方法即注意事项。了解细菌、放线菌、酵母菌、霉菌这四大类微生物菌落的特征，使学生能凭其菌落特征大体区分开这四大类微生物。
实验六 酵母菌的形态观察及显微镜计数法（3学时）
了解酵母菌的形态及出芽方式，掌握利用血球计数板对酵母菌进行镜检计数的原理和方法，对实验中易出现的镜检计数结果误差应正确进行分析。
实验七 培养基的制备（3学时）
了解培养基配制的基本原则，掌握PDA培养基、高氏一号培养基和牛肉膏蛋白胨培养基的配制方法。了解高压蒸汽灭菌和干热灭菌的原理及应用范围，学习高压蒸汽灭菌的操作方法。
实验八 微生物的分离纯化及平板菌落计数（3学时）
掌握倒平板的方法和几种常用的分离纯化微生物的操作技术及平板菌落计数法，掌握微生物的无菌操作技术和微生物的培养方法。
实验九 抗生素的效价测定（3学时）
了解稀释法、比浊法、扩散法等生物方法测定抗生素效价的基本原理和方法，掌握管碟法测定抗生素效价的步骤和方法。
实验十 糖发酵试验（3学时）
了解糖发酵的原理和在肠道细菌鉴定中的重要作用，掌握利用糖发酵试验鉴别不同微生物的步骤和方法。
实验十一 微生物的诱发突变（3学时）
了解紫外线和亚硝基胍等理化因素对微生物的诱变机制，并掌握基本操作方法。学习转座因子所引起的插入突变和体外诱变的基本原理。
实验十二 水中细菌总数和大肠菌群的测定（3学时）
学习水样中的采取方法和水样细菌总数测定的方法，了解水源水的平板菌落计数的原则。学习测定水中大肠菌群数量的多管发酵法，了解大肠菌群的数量在饮水中的重要性。
三、实验项目及内容提要
| ******实验 （课程代码） |
| 序号 | 实验名称 | 学时 | 必开 | 选开 | 实验类型 | 内容提要 |
| 验 证 性 | 基本 操作 | 综 合 性 | 设 计 性 |
| 1 | 光学显微镜的使用及细菌的简单染色法 | 3 | √ | | √ | √ | | | 低倍镜、高倍镜、尤其是油镜使用方法、无菌操作技术、细菌的简单染色 |
| 2 | 革兰氏染色法 | 3 | √ | | √ | √ | | | 油镜的使用的、无菌操作技术、革兰氏染色 |
| 3 | 细菌的芽孢染色法和荚膜染色法 | 3 | √ | | √ | √ | | | 芽孢和荚膜的染色步骤 |
| 4 | 放线菌的形态观察 | 3 | √ | | √ | √ | | | 放线菌的形态观察、放线菌的染色步骤和方法 |
| 5 | 霉菌的形态观察即菌落特征观察 | 3 | √ | | √ | √ | | | 霉菌形态观察、菌落特征观察和描述 |
| 6 | 酵母菌的形态观察及显微镜计数法 | 3 | √ | | | √ | | | 酵母菌形态观察、显微镜标尺的校对、显微镜计数 |
| 7 | 培养基的制备 | 3 | √ | | | √ | √ | | 实验室灭菌、培养基的制备 |
| 8 | 微生物的分离纯化及平板菌落计数 | 3 | √ | | √ | | √ | | 微生物的分离纯化、微生物的平板计数 |
| 9 | 抗生素的效价测定 | 3 | √ | | √ | | √ | | 抗生素的校价测定 |
| 10 | 糖发酵试验 | 3 | √ | | √ | | √ | | 利用糖发酵试验鉴别不同微生物的步骤和方法 |
| 11 | 微生物的诱发突变 | 3 | √ | | | √ | | √ | 微生物诱发突变的基本操作方法 |
| 12 | 水中细菌总数和大肠菌群的测定 | 3 | √ | | | √ | | √ | 测定水中大肠菌群数量的多管发酵法 |
四、实验内容安排
本课程实验学时共36学时，设12个实验，分别如下：
实验一 光学显微镜的使用及细菌的简单染色法（3学时）
实验二 革兰氏染色法（3学时）
实验三 细菌的芽孢染色法和荚膜染色法（3学时）
实验四 放线菌的形态观察（3学时）
实验五 霉菌的形态观察即菌落特征观察（3学时）
实验六 酵母菌的形态观察及显微镜计数法（3学时）
实验七 培养基的制备（3学时）
实验八 微生物的分离纯化及平板菌落计数（3学时）
实验九 抗生素的效价测定（3学时）
实验十 糖发酵试验（3学时）
实验十一 微生物的诱发突变（3学时）
实验十二 水中细菌总数和大肠菌群的测定（3学时）
五、实验报告的格式
实验＊＊ （题目）
（一） 实验目的
（二） 器材准备（包括菌种）
（三） 实验步骤
（四） 实验结果及其分析
（五） 作业
六、本课程考核方式、方法及实验成绩评定方法
实验成绩100%，其中平时成绩占20％，实验报告成绩占80％。最后以20％的成绩记录《普通微生物学》的总成绩中。
七、实验应配套的主要仪器设备及台（套）数（以一个实验教学班为标准）
| 序号 | 主要设备 | 数目 | 备注 |
| 1 | 光学显微镜 | 32（台） | 要有油镜 |
| 2 | 超净工作台 | 1（台） | |
| 3 | 冰箱 | 1（台） | |
| 4 | 培养箱 | 2（台） | |
| 5 | 微波炉 | 1（台） | |
| 6 | 高压灭菌锅 | 2（台） | |
